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        豬細小病毒熒光定量PCR檢測方法的建立及其感染PK-15細胞后的蛋白質組學研究
         
             論文目錄
         
        致謝第5-10頁
        摘要第10-12頁
        文獻綜述第12-21頁
            1 豬細小病毒(porcine parvovirus)概述第12-17頁
                1.1 病原第12-13頁
                1.2 豬細小病毒的分型第13頁
                1.3 豬細小病毒基因組第13-14頁
                1.4 豬細小病毒編碼的病毒蛋白第14-15頁
                1.5 豬細小病毒流行特點和現狀第15-16頁
                1.6 豬細小病毒檢測方法第16頁
                1.7 豬細小病毒感染機制第16-17頁
            2 豬細小病毒參與的細胞過程第17-18頁
                2.1 細胞凋亡第17-18頁
                    2.1.1 外源性細胞凋亡第17頁
                    2.1.2 內源性細胞凋亡第17-18頁
                    2.1.3 豬細小病毒和非結構蛋白NS1引起的細胞凋亡第18頁
                2.2 豬細小病毒誘導的免疫應答第18頁
            3 蛋白組學概述第18-21頁
                3.1 TMT概述第19頁
                3.2 蛋白組學在研究病毒感染中的應用第19-21頁
        引言第21-22頁
        試驗一 PPV熒光定量方法的建立及應用第22-28頁
            1 材料與方法第22-25頁
                1.1 材料第22-23頁
                    1.1.1 病毒及臨床樣品第22頁
                    1.1.2 主要儀器第22頁
                    1.1.3 主要試劑第22頁
                    1.1.4 主要試劑的配制第22-23頁
                1.2 方法第23-25頁
                    1.2.1 PPV熒光定量檢測引物的設計與合成第23頁
                    1.2.2 病料的研磨與基因組DNA的提取第23頁
                    1.2.3 目的基因的PCR擴增第23頁
                    1.2.4 純化回收PCR產物第23頁
                    1.2.5 目的片段與T載體的連接第23-24頁
                    1.2.6 連接產物的轉化第24頁
                    1.2.7 重組質粒的鑒定第24頁
                    1.2.8 質粒提取與濃度測定第24頁
                    1.2.9 PPV熒光定量檢測標準曲線的建立第24-25頁
                    1.2.10 PPV熒光定量重復性檢測第25頁
                    1.2.11 PPV熒光定量特異性和敏感性檢測第25頁
                    1.2.12 臨床樣品PPV的檢測第25頁
            2 結果與分析第25-27頁
                2.1 目的基因的PCR擴增結果第25-26頁
                2.2 PPV熒光定量檢測方法標準曲線的建立和重復性檢測結果第26頁
                2.3 PPV熒光定量檢測方法特異性和敏感性檢測結果第26-27頁
                2.4 臨床樣品PPV的檢測第27頁
            3 結論與討論第27-28頁
        試驗二 基于TMT技術分析PPV感染PK-15細胞蛋白組學變化第28-39頁
            1 材料與方法第28-32頁
                1.1 材料第28-29頁
                    1.1.1 細胞與病毒第28頁
                    1.1.2 主要試驗試劑第28頁
                    1.1.3 主要試驗儀器第28頁
                    1.1.4 主要試劑的配制第28-29頁
                    1.1.5 分析軟件第29頁
                1.2 試驗方法第29-32頁
                    1.2.1 PK-15細胞的培養第29頁
                    1.2.2 細胞計數第29頁
                    1.2.3 病毒的增殖第29頁
                    1.2.4 病毒滴度測定第29頁
                    1.2.5 PPV感染PK-15細胞生長曲線的測定第29-30頁
                    1.2.6 病毒感染細胞的準備第30頁
                    1.2.7 病毒感染細胞蛋白樣本的制備第30頁
                    1.2.8 SDS-PAGE電泳第30頁
                    1.2.9 酶解和肽段定量第30-31頁
                    1.2.10 SCX分級第31頁
                    1.2.11 毛細管高效液相色譜第31頁
                    1.2.12 質譜鑒定第31-32頁
                1.3 數據分析第32頁
                    1.3.1 原始質譜數據第32頁
                    1.3.2 數據庫第32頁
                    1.3.3 數據庫檢索第32頁
                    1.3.4 生物信息學分析第32頁
            2 結果與分析第32-37頁
                2.1 PPV感染PK-15細胞生長曲線的測定第32-33頁
                2.2 PPV感染PK-15細胞第33-34頁
                2.3 PPV感染PK-15細胞蛋白組學結果第34頁
                2.4 肽段長度分布第34-35頁
                2.5 肽段覆蓋度分布第35頁
                2.6 蛋白質分子量分布第35-36頁
                2.7 鑒定蛋白火山圖分布第36-37頁
            3 結論與討論第37-39頁
        試驗三 PPV感染PK-15細胞差異蛋白生物信息學分析第39-47頁
            1 材料第39頁
                1.1 分析軟件第39頁
                1.2 分析網站第39頁
                1.3 數據庫第39頁
            2 結果與分析第39-45頁
                2.1 差異表達蛋白質聚類分析第39-41頁
                2.2 GO功能富集分析第41-44頁
                2.3 KEGG分析第44-45頁
            3 結論與討論第45-47頁
        試驗四 PPV感染PK-15細胞不同時間蛋白組學分析第47-52頁
            1 材料第47頁
            2 結果與分析第47-50頁
                2.1 鑒定蛋白火山圖分布第47頁
                2.2 差異表達蛋白質聚類分析第47-48頁
                2.3 GO功能富集分析第48-49頁
                2.4 KEGG分析第49-50頁
            3 結論與討論第50-52頁
        全文總結第52-53頁
        參考文獻第53-61頁
        ABSTRACT第61-63頁

         
         
        論文編號BS4734438,這篇論文共63
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