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        RF-SRCA方法檢測抗除草劑草甘膦大豆及其制品的研究
         
             論文目錄
         
        摘要第4-6頁
        Abstract第6-8頁
        1 引言第12-26頁
            1.1 立題背景與意義第12-13頁
            1.2 轉基因作物概述第13-14頁
            1.3 轉基因大豆概述第14-15頁
            1.4 轉基因作物的安全性第15頁
            1.5 轉基因食品的管理第15-16頁
            1.6 國內外轉基因食品檢測方法研究進展第16-21頁
                1.6.1 基于蛋白質的檢測方法第16-17頁
                1.6.2 基于DNA的檢測方法第17-20頁
                1.6.3 其他檢測方法第20-21頁
            1.7 跨越式滾環等溫擴增技術第21-22頁
                1.7.1 SRCA技術概述第21頁
                1.7.2 SRCA技術擴增原理第21-22頁
                1.7.3 SRCA技術的優點與局限性第22頁
            1.8 實時熒光跨越式滾環等溫擴增方法第22-24頁
                1.8.1 RF-SRCA方法概述第22-23頁
                1.8.2 熒光染料的選擇第23頁
                1.8.3 RF-SRCA擴增結果判定方法第23-24頁
            1.9 本研究主要內容第24-25頁
            1.10 本研究技術路線第25-26頁
        2 材料與方法第26-39頁
            2.1 材料與試劑第26-28頁
                2.1.1 試驗材料第26-27頁
                2.1.2 試驗試劑第27頁
                2.1.3 試驗儀器與設備第27-28頁
            2.2 試驗方法第28-32頁
                2.2.1 基因組DNA的提取第28頁
                2.2.2 基因組DNA濃度及純度測定第28頁
                2.2.3 引物設計第28-30頁
                2.2.4 引物稀釋及保存第30頁
                2.2.5 RF-SRCA預反應體系第30-31頁
                2.2.6 RF-SRCA預反應條件和預反應程序第31頁
                2.2.7 RT-PCR反應體系和反應程序第31-32頁
                2.2.8 RT-LAMP反應體系和反應程序第32頁
            2.3 RF-SRCA反應條件和反應體系的優化第32-34頁
                2.3.1 反應溫度的優化第32-33頁
                2.3.2 MgSO_4添加量的優化第33頁
                2.3.3 dNTPs添加量的優化第33頁
                2.3.4 BstDNA聚合酶緩沖液添加量的優化第33-34頁
                2.3.5 引物添加量的優化第34頁
                2.3.6 BstDNA聚合酶添加量的優化第34頁
                2.3.7 熒光染料添加量的優化第34頁
            2.4 RF-SRCA擴增結果分析第34-35頁
                2.4.1 實時熒光擴增曲線法結果分析第34-35頁
                2.4.2 可視化法結果分析第35頁
                2.4.3 凝膠電泳法結果分析第35頁
            2.5 RF-SRCA擴增產物測序分析第35-36頁
            2.6 引物特異性分析第36頁
            2.7 靈敏度分析第36-37頁
                2.7.1 RF-SRCA靈敏度分析第36頁
                2.7.2 RT-PCR靈敏度分析第36頁
                2.7.3 RT-LAMP靈敏度分析第36-37頁
                2.7.4 RF-SRCA、RT-PCR和RT-LAMP的靈敏度比較第37頁
            2.8 檢出限分析第37-38頁
                2.8.1 人工加標樣品處理第37頁
                2.8.2 RF-SRCA檢出限分析第37頁
                2.8.3 RT-PCR檢出限分析第37頁
                2.8.4 RT-LAMP檢出限分析第37頁
                2.8.5 RF-SRCA、RT-PCR和RT-LAMP的檢出限比較第37-38頁
            2.9 RF-SRCA方法的實際應用第38-39頁
        3 結果與分析第39-58頁
            3.1 模板DNA質量測定結果分析第39頁
            3.2 模板DNA質量控制結果分析第39-40頁
            3.3 RF-SRCA反應條件和反應體系的優化第40-44頁
                3.3.1 反應溫度的優化第40-41頁
                3.3.2 MgSO_4添加量的優化第41頁
                3.3.3 dNTPs添加量的優化第41-42頁
                3.3.4 BstDNA聚合酶緩沖液添加量的優化第42頁
                3.3.5 引物添加量的優化第42-43頁
                3.3.6 BstDNA聚合酶添加量的優化第43頁
                3.3.7 熒光染料EvaGreen添加量的優化第43-44頁
            3.4 RF-SRCA最終反應條件和反應體系第44頁
            3.5 RF-SRCA擴增結果分析第44-46頁
                3.5.1 實時熒光擴增曲線法擴增結果分析第44-45頁
                3.5.2 可視化法擴增結果分析第45頁
                3.5.3 凝膠電泳法擴增結果分析第45-46頁
            3.6 RF-SRCA擴增產物測序分析第46-47頁
            3.7 RF-SRCA引物特異性驗證第47-50頁
                3.7.1 實時熒光擴增曲線法特異性分析第48頁
                3.7.2 可視化法特異性分析第48-49頁
                3.7.3 凝膠電泳法特異性分析第49-50頁
            3.8 靈敏度分析第50-53頁
                3.8.1 RF-SRCA實時熒光擴增曲線法靈敏度測定第50-51頁
                3.8.2 RF-SRCA可視化法靈敏度測定第51頁
                3.8.3 RF-SRCA凝膠電泳法靈敏度測定第51-52頁
                3.8.4 RT-PCR靈敏度測定第52-53頁
                3.8.5 RT-LAMP靈敏度測定第53頁
            3.9 檢出限分析第53-56頁
                3.9.1 RF-SRCA實時熒光擴增曲線法檢出限測定第53-54頁
                3.9.2 RF-SRCA可視化法檢出限測定第54頁
                3.9.3 RF-SRCA凝膠電泳法檢出限測定第54-55頁
                3.9.4 RT-PCR檢出限測定第55-56頁
                3.9.5 RT-LAMP檢出限測定第56頁
            3.10 RF-SRCA方法的應用與評價第56-58頁
        4 討論第58-62頁
            4.1 RF-SRCA方法評價第58頁
            4.2 RF-SRCA方法的優勢第58-59頁
            4.3 不同轉基因作物檢測方法的比較第59-60頁
            4.4 大豆基因組DNA的提取和質量控制第60頁
            4.5 影響RF-SRCA反應的主要因素第60-61頁
                4.5.1 靶基因的選擇第60頁
                4.5.2 引物設計第60-61頁
                4.5.3 其他影響因素第61頁
            4.6 RF-SRCA反應注意事項第61-62頁
        5 結論與展望第62-64頁
            5.1 結論第62-63頁
            5.2 展望第63-64頁
        參考文獻第64-73頁
        作者簡歷第73-74頁
        碩士期間發表學術論文第74-75頁
        致謝第75頁

         
         
        論文編號BS4734485,這篇論文共75
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